厌氧培养箱亦称厌氧工作站或厌氧手套箱。
厌氧培养箱是一种在无氧环境条件下进行细菌培养及操作的装置。它能提供严格的厌氧状态恒定的温度培养条件和具有一个系统化、科学化的工作区域。
（一）操作室厌氧环境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室内放入二个无毒塑料袋；
2. 通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度及安全温度；
3. 操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示剂（封闭）；
4. 关紧取样室内外门，并抽真空校验；
5. 操作室内*次置换（氮气置换）：
A. 先用橡皮管插入操作室内进气口，另一头插入塑料袋；
B. 接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使二只塑料袋充足氮气，关闭阀门1，然后扎紧袋口；
C. 把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧；
D. 把塑料袋内氮气渐渐放于操作室内，至全部放出。
6. 操作室第二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。
7. 操作室第三次置换（混合气体置换）：（混合气体配比为N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
A. 调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气；
B. 混合气充满塑料袋后，关掉混合气阀并打开阀5，使混合气经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右；
C. 把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内；
D. 通过三次换气后，操作室内气体含氧量已处于极微量状态。
8. 操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后开美兰指示剂（美兰安瓶）观察其变色情况，不变色为操作室内达到厌氧环境；
9. 开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。
（二）菌种的置入和培养：
1. 检查取样室内门并关紧之；
2. 打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；
3. 取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，后掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束；
4. 如选定真空度较低就需要增加置换的次数；
5. 取样室内外门开启、关紧，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）检验；
A. 每天在操作室内打开美兰指示剂观察，如不正常就必须重新换气；
B. 要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10ml左右；
C. 连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。
7. 操作室内培养室内室温度可任意选择和控制。
8. 混合气瓶、氮气瓶输出压力调整：调节减压阀，使输出压力0.1Mpa左右。
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